意大利 CrestOptics 公司 是开发和制造先进荧光显微成像系统的高技术公司，其产品包括 X-Light 系列转盘共聚焦模块，最近还推出了用于 3D 样品的超分辨率成像模块 DeepSIM。销售和营销主管 Scarpellini 博士告诉我们：“我们发现用户对以更高分辨率观察生物样品的需求在增加，但由于成本高、样品制备困难、与活体样品成像不兼容等因素，许多超分辨成像技术无法使用。这就是我们开发 DeepSIM 的原因，用户可以用平时使用的样品，但在不同的配置下进行实验，如将 DeepSIM 与转盘共聚焦结合或独立使用、在正置或倒置显微镜上、选用不同倍率的物镜等。”应用专家 Giubettini 博士进一步介绍说：“该模块可以在宽场，转盘和 DeepSIM 三种模式下进行快速切换。使用相同的样品制备，您可以切换到 SIM 来观察样品的更多细节。”
图1：Kinetix sCMOS 相机拍摄的宽场（WF）、X-Light V3 转盘共聚焦（CF）和 DeepSIM 图片比较。首行为 60x 的 HeLa 细胞（绿色的是 GFP-α 微管蛋白，红色的是溶酶体）；中间行是 20x 的人脑类器官（绿色为 CTIP2 阳性深层皮质神经元，红色为泛神经元 MAP2）；底行是 60μm 厚的 3D 小鼠脑组织。DeepSIM 需要一台可以高速成像的相机，同时在低曝光下保持良好的信噪比，以及 6.5μm 像素尺寸。此外，当 DeepSIM 与 X-Light V3 转盘共聚焦结合使用时，最大视野增加到 25mm，需要具有大版面传感器的相机。Scarpellini 博士说：“我们需要获取多帧来重构一张超分辨率图像，因此，低读出时间、高帧率以及高灵敏度对我们来说很重要。”
图2：CrestOptics 案例中提到的一整套产品，可以看到装在 X-Light V3 转盘模块的 Kinetix 和 Prime 95B sCMOS 相机，转接到 DeepSIM 模块，最后接到尼康 Ti-2 显微镜的光口。 Kinetix 背照式 sCMOS 相机 是 CrestOptics 成像系统的理想解决方案。其具有极高的帧速率（全画幅达 498fps）、高灵敏度（读出噪声低至 0.7e-、量子效率峰值 95%）、大视野（传感器对角线 ~29mm）和 6.5μm 像素尺寸等特性，可以满足不同实验的应用需求。Scarpellini 博士说：“Kinetix 因为它的高帧率和大视野，是一款我们非常喜欢的 X-Light V3 转盘系统相机，这也使得 Kinetix 成为将转盘与 DeepSIM 相结合的非常好选择。”
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